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人胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒使用說明書
發(fā)布時間:2024/12/19瀏覽:152次
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人胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒使用說明書 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護(hù)和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo),本生,您信任的合作伙伴!本生試劑盒

  人胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒使用說明書通常包括試劑盒的用途、實驗原理、試劑盒組成、樣本處理及要求、操作步驟、注意事項以及試劑盒性能等內(nèi)容。以下是一份基于多個來源整合的IGF-1 ELISA試劑盒使用說明書概要:

  一、試劑盒用途

  本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中人胰島素樣生長因子1(IGF-1)的含量。

  二、實驗原理

  試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被人胰島素樣生長因子1(IGF-1)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人胰島素樣生長因子1(IGF-1)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。

  三、試劑盒組成

  試劑盒通常包含以下組件(具體數(shù)量可能因不同廠家或批次而異):

  酶標(biāo)包被板

  標(biāo)準(zhǔn)品

  標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

  酶標(biāo)試劑

  樣品稀釋液

  顯色劑A液和B液

  終止液

  濃縮洗滌液

  封板膜

  密封袋

  說明書

  四、樣本處理及要求

  ?血清?:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

  ?血漿?:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

  ?組織勻漿?:用預(yù)冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎或反復(fù)凍融。后將勻漿液于5000×g離心5-10分鐘,取上清檢測。

  ?細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本?:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

  五、操作步驟

  ?標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣?:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔,加入不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品。

  ?加樣?:分別設(shè)空白孔、待測樣品孔,加入待測樣品。

  ?溫育?:用封板膜封板后置37℃溫育一定時間。

  ?洗滌?:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置后棄去,重復(fù)多次,拍干。

  ?加酶?:每孔加入酶標(biāo)試劑(空白孔除外)。

  ?溫育?:同前。

  ?洗滌?:同前。

  ?顯色?:每孔加入顯色劑A和B,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色一定時間。

  ?終止?:每孔加終止液,終止反應(yīng)。

  ?測定?:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。

  六、注意事項

  試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。

  濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。

  各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。

  請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔。

  封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

  底物請避光保存。

  嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。

  所有樣品、洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

  七、試劑盒性能

  ?檢測范圍?:根據(jù)不同廠家和批次,檢測范圍可能有所不同,如5ng/mL~160ng/mL。

  ?靈敏度?:低檢測濃度小于一定值,如1.0ng/mL。

  ?特異性?:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

  ?重復(fù)性?:板內(nèi)變異系數(shù)和板間變異系數(shù)均小于一定值,如板內(nèi)變異系數(shù)小于10%,板間變異系數(shù)小于15%。

  請注意,以上內(nèi)容僅為一般性說明,具體使用時應(yīng)嚴(yán)格遵循所購試劑盒附帶的使用說明書進(jìn)行操作。

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