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垂直電泳槽(雙板/四板)操作全解析:從灌膠到轉印的避坑手冊
更新時間:2025-06-19瀏覽:223次

  垂直電泳槽(雙板/四板)操作全解析:從灌膠到轉印的避坑手冊

  以下是天津本生 垂直電泳槽(雙板/四板)全流程操作解析及避坑指南,綜合結構差異與實驗優(yōu)化要點:

  一、?灌膠階段關鍵操作?

  玻璃板組裝?

  雙板槽需手動對齊玻璃板并密封橡膠框,四板槽采用凸輪卡鎖制膠框快速對齊;

  玻璃板傾斜20°安裝(薄板略高于厚板)可有效防漏膠。

  凝膠配制?

  分離膠?:灌膠后覆蓋去離子水或無水乙醇壓平界面,避免波浪狀條帶;

  濃縮膠?:插入梳子后需補膠,防止凝固收縮導致上樣孔變形。

  防漏膠技巧?

  檢查橡膠墊老化情況,優(yōu)先選用高粘性軟墊;

  四板槽需確保實驗臺絕對水平,避免多膠同步漏液。


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  二、?電泳運行優(yōu)化?

  問題? ?原因? ?解決方案?

  條帶扭曲 電場不均或緩沖液陳舊 預電泳5分鐘平衡電場,更換新鮮緩沖液

  內槽漏液 密封條老化或玻璃板未壓緊 更換密封條,雙手斜角位均勻擰緊螺絲

  電泳速度過慢 電壓設置過低(雙板槽<200V) 四板槽可調至150V同步運行4塊膠

  三、?轉印環(huán)節(jié)避坑要點?

  膜處理?

  PVDF膜需甲醇激活30秒,NC膜直接浸潤轉印緩沖液;

  大蛋白(>100kDa)用0.45μm膜,小蛋白選0.22μm。

  三明治組裝?

  濾紙/膜/膠疊放后需用玻璃棒滾動排氣泡;

  四板槽轉印時需獨立檢查每塊膠的轉印方向。

  參數(shù)設置?

  常規(guī)轉印條件:100V恒壓1小時(需冰浴);

  高分子量蛋白建議降電壓至80V延長至2小時。

  四、?維護與故障處理?

  電極維護?:每月用10%醋酸浸泡鉑金絲10分鐘除鹽結晶;

  漏液應急?:立即斷電,用瓊脂封堵縫隙后重啟;

  冷卻系統(tǒng)?:四板槽優(yōu)先選集成散熱設計,雙板槽需外接循環(huán)水(15-20℃)。

  通過規(guī)范操作與針對性優(yōu)化,可顯著提升垂直電泳的穩(wěn)定性和重復性。

  根據(jù)實驗通量、預算及操作復雜度綜合選擇,可參考廠商提供的兼容性參數(shù)(如天津本生雙板 BS-mini01 和四板 BS-mini04 )。

  BS-300 基礎性電泳儀電源

  BS-600C 通用型電泳儀電源

  BS-mini01 垂直電泳槽(雙板)

  BS-mini04 垂直電泳槽(四板)

  BS-ZY03 轉印電泳槽(WB雙板和鉑樂通用)

  BS-ZY04 轉印電泳槽 (WB四板)

  BS-sub02 瓊脂糖電泳槽

  注:以上資料僅供參考,具體請咨詢技術老師。

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