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牛白細(xì)胞介素6ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
更新時(shí)間:2020-11-20瀏覽:1242次

  牛白細(xì)胞介素6ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理

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  實(shí)驗(yàn)原理

  牛白細(xì)胞介素6ELISA試劑盒用于測定牛血清、血漿及相關(guān)液體樣本中白細(xì)胞介素6(IL-6)含量。應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中牛白細(xì)胞介素6(IL-6)水平。用純化的牛白細(xì)胞介素6(IL-6)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白細(xì)胞介素6(IL-6),再與HRP標(biāo)記的白細(xì)胞介素6(IL-6)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細(xì)胞介素6(IL-6)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中牛白細(xì)胞介素6(IL-6)濃度。

  注意事項(xiàng)

  1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

  2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

  3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

  4.請(qǐng)每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

  5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

  6.底物請(qǐng)避光保存。

  7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

  8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

  9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

  10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。

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